测定意义
锌是必需的微量元素之一,在胰岛素和卟啉代谢中也起重要作用。
本试剂盒适用于检测血清、血浆、尿液、乳汁中的锌含量。
测定原理
锌离子与试剂 5-Br-PADAP 的特异性显色反应。在特定的酸碱度条件下,锌离子(Zn²⁺)与5-Br-PADAP能形成稳定的、具有特征颜色的络合物,颜色的深浅与锌离子浓度成正比。
需自备的仪器和用品
离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
试剂的组成和配制
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃避光保存。
标准液:液体×1支,1mM Zn2+标准液。4℃避光保存。临用前用蒸馏水稀释到30μuM;
在此法测定条件下,Cu2+、Fe2+含量少于68uμmol/L不干扰。血清中其他常量和微量元素不干扰,血清中胆红素含量低于60mg/L不干扰,溶血和浑浊血清有干扰。
预实验的意义
比色法检测试剂盒预实验非常重要
1、确定该试剂盒是否适合客户的样本检测,以免造成试剂盒和样本的浪费(比如低表达处理的样本);
2、熟悉生化试剂盒的操作流程,尤其是初次使用生化试剂盒测定;
3、确定样本的处理方法及稀释倍数是否合适;
4、了解实验过程中可能出现的实验现象或问题,以便于及时作出调整;
5、通过3 - 5组预实验,判断试剂盒对于样本的适应稀释浓度范围,指导实验样本稀释比例。
注意
正式测定前务必取 3 - 5 个预期差异较大的样本做预测定