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  • 土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性检测试剂盒
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土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性检测试剂盒
测定意义
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶活性是土壤碳 - 氮循环效率、微生物功能、肥力水平、生态健康及病虫害防控潜力的综合生物标志物,其测定不仅能揭示土壤内部养分循环的规律,还能为农业氮素管理、绿色防控、生态环境监测与修复提供精准的量化依据,是土壤酶学研究中与纤维二糖酶同等重要的核心检测指标。
测定原理
S-NAG分解4-MUF-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷,产生荧光物质,通过测定荧光值升高速率来计算S-NAG活性。
自备用品
酶标仪、台式离心机、恒温培养箱、可调式移液器、黑色96孔板和蒸馏水。
测定步骤
1、荧光酶标仪预热30min以上,设置激发光波长 355 nm,测定波长 450nm。
2、加样表

试剂名称

测定管

空白管

震荡条件下取匀待测液(μLL)

200

-

蒸馏水(μL)

-

200

试剂二(μL)

200

200

混匀, 30℃避光振荡反应3h后, 3000g 4℃离心3min,取上清液200μL于黑色96孔板中,检测荧光值,激发波长355nm,发射波长450nm。荧光值分别为A测定管,A空白管,计算ΔA=A测定管-A空白管。

预实验的意义
比色法检测试剂盒预实验非常重要
1、确定该试剂盒是否适合客户的样本检测,以免造成试剂盒和样本的浪费(比如低表达处理的样本);
2、熟悉生化试剂盒的操作流程,尤其是初次使用生化试剂盒测定;
3、确定样本的处理方法及稀释倍数是否合适;
4、了解实验过程中可能出现的实验现象或问题,以便于及时作出调整;
5、通过3 - 5组预实验,判断试剂盒对于样本的最佳适应稀释浓度范围,指导实验样本稀释比例。
注意
正式测定前务必取 3 - 5 个预期差异较大的样本做预测定。

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