应用范围
HA标签融合蛋白的纯化和免疫(共)沉淀。
HA标签可以位于蛋白的N端,C端或中间,如N端HA融合蛋白(HA–Protein)、C端HA融合蛋白(Protein-HA)和Met修饰的N端HA融合蛋白(Met-HA–Protein)。
抗体属性
兔单克隆抗体,IgG2a亚型。
磁珠属性
磁珠,平均粒径1μm。
磁珠载量及使用方法
0.5mL纳米磁珠,共价偶联0.1mg Anti-HA小鼠单克隆抗体。
常规IP或Co-IP用量,取107个细胞,加入1mL NP-40裂解液,冰上孵育30min,将细胞连同裂解液转移到1.5mL EP管中,12000rpm离心10min,取上清裂解液400μL,加入30μL磁珠,室温翻转孵育1h,孵育期间加入蛋白酶抑制剂,抑制剂的选择根据实验需求而定,使用磁力架分离磁珠,使用预冷的PBS清洗三次磁珠,加入20μL NP-40裂解液,再加入20μL 2×loading buffer,煮样,用作SDS-PAGE,每孔上样量20μL。
检测结果
从左往右,泳道依次为Marker,未结合蛋白的磁珠,下拉融合HA标签的靶标蛋白。
储存条件
4℃,18个月
注意事项
1. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 本产品以悬液形式提供亲和磁珠,悬液中磁珠的含量为25%,使用前先温和重悬磁珠悬液,然后按照需求取用。
4. 勿离心、冷冻、干燥磁珠,勿使用超声处理磁珠,勿使酸处理磁珠时间超过10min。
5. 混匀磁珠时,请采用移液枪轻柔吹打,柔和涡旋,上下颠倒及摇床混匀等方法。勿使用超声等方法。
6. 配套使用的相关试剂,需实验室自备。
共有(72)人参考评价
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